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CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性

CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性

CAS号 0-00-0
规格 5毫升
纯度 实验室纯度
货号 CT-K-5
货期 3天
品牌 炎熙生物
库存 10000包
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参考价: ¥480.00 元/包
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产品详情

详细信息(中文):
检测原理
CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品,能在电子载体1-甲氧基PMS的作用下被还原成水溶性甲臜产物,生成的甲臜量与活细胞数量成正比,因此颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,可以反映活细胞数量。

CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:
★灵敏度高,数据可靠,重现性好
★操作简便,省时省力
★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
★适合于高通量药物筛选
CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
注意事项:
1,由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的PBS、 水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2,本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应, 所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。培养基中酚红和血清的吸光度,在计算时通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
3,有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK-8试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。加完之后最好能够离心,以免CCK-8液滴悬挂在壁上。用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
4,若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
5,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。白细胞可能需要培养较长时间。若使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总

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